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    當藥苷調節興奮-收縮耦聯改善心肌缺血再灌注損傷的機制研究

    唐家楊  王青  于雪  魏小棋  于江  李帥  李森  郭淑貞  
    【摘要】:目的:探索當藥苷通過興奮-收縮耦聯信號通路對缺血再灌注損傷后心臟收縮/舒張功能的影響。方法:24只健康雄性SD大鼠隨機分為正常組,模型組,10 μmol·L~(-1)當藥苷給藥組與1 μmol·L~(-1)地高辛給藥組,并采用Langendorff系統結合左前降支冠狀動脈結扎建立缺血再灌注損傷模型(I/R),TTC染色檢測各組心臟梗死面積,Powerlab生理記錄儀檢測血流動力學參數,如左心室舒張壓(LVDP)、左心室終末舒張壓(LVEDP)、左心室終末收縮壓(LVESP)、左心室內壓最大上升速率(+dp/dt_(max))和左心室內壓最大下降速率(-dp/dt_(max));提取分離乳鼠原代心肌細胞(NRCMs),建立缺氧/復氧(H/R)損傷模型,隨機分為正常組,模型組,1 μmol·L~(-1)當藥苷給藥組和10 μmol·L~(-1)當藥苷給藥組,多功能成像細胞分析儀和激光共聚焦顯微鏡測定各組心肌細胞活力、心率、收縮幅度、收縮時程、達峰時程和舒張時程以及鈣瞬變峰值。根據前期轉錄組學測序結果以及文獻調研,利用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(Real-time PCR)驗證L型鈣通道相關基因(Cacnb2),細胞色素c氧化酶相關基因(Cox6a2),肌鈣蛋白(Tnnc1、Tnni3、Tnnt2)、肌動蛋白(Actc1)、肌球蛋白(Myh6、Myl2、Myl4)等興奮-收縮耦聯通路基因的mRNA表達并對差異基因進行聚類分析。結果:與正常組相比,模型組心肌梗死面積增加(P0.01)、LVDP降低(P0.01)、LVEDP上升(P0.01)、LVESP下降(P0.05)、+dp/dt_(max)有下降趨勢和-dp/dt_(max)上升趨勢以及心肌細胞活力降低、心率降低、收縮幅度降低、收縮時程升高、達峰時程升高和舒張時程升高(P0.01),而當藥苷可以逆轉上述指標(P0.05)。此外,心肌細胞經H/R損傷后,Cacnb2、Cox6a2、Tnnc1、Tnni3、Tnnt2、Actc1、Myh6、Myl2、Myl4等興奮-收縮耦聯通路的基因表達下降(P0.05、P0.01)。而使用當藥苷預處理后,可以增強上述基因的表達(P0.05)。結論:當藥苷通過調節興奮-收縮耦聯信號通路,從而調節原代乳鼠心肌細胞內鈣離子水平,增強心肌收縮功能,對抗I/R損傷。
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